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上海恒遠(yuǎn)邀您來看ELISA測(cè)定結(jié)果分析方案

更新時(shí)間:2018-12-12   點(diǎn)擊次數(shù):1754次

    日前上午,我公司錢經(jīng)理收到浙江大學(xué)鄭老師發(fā)來的qq會(huì)話 。鄭老師表示:ELISA試劑盒的檢測(cè)結(jié)果不理想,不知道是哪里出了問題。幫我看下是什么原因,我自己合成8個(gè)氨基酸的抗原短肽,和BSA耦連后免疫動(dòng)物,1個(gè)月后用ELISA測(cè)定血清中針對(duì)抗原短肽的抗體滴度,具體步驟:用碳酸緩沖液溶解抗原短肽后包板,4度冰箱18小時(shí), 再用1%OVA37度封閉2小時(shí),洗板3次。待測(cè)血清用10%小牛血清倍比稀 釋,37度溫育1小時(shí),洗板3次,加入二抗,37度溫育40分鐘,洗板3次 ,加TMB顯色,結(jié)果比較詭異,陰性對(duì)照也顯色了,且OD值和陽性差別不大。是什么原因呢?是洗板的問題嗎?


    錢經(jīng)理將問題轉(zhuǎn)至技術(shù)部,上海恒遠(yuǎn)生物公司專業(yè)技術(shù)員回應(yīng), ELISA結(jié)果不理想原因可以根據(jù)這幾個(gè)方面分析:
    1.洗板是否串孔,如串孔的話可能造成污染;你一抗、二抗 每次洗板時(shí)洗5遍以上。
    2.封閉液的問題,你說陰性對(duì)照也顯色了,那主要的問題應(yīng)該是封閉,應(yīng)重新考慮用OVA封閉是否適合,如果OVA封閉效果不好的話 可以選擇其他的封閉液。封閉液的選擇園子里有很多相關(guān)的帖,你搜一下看看。
    3.建議ELISA試劑盒包被在37度兩小時(shí),這樣的效果可能會(huì)好 一些。


    上海恒遠(yuǎn)生物公司為您提供BIM、R&D、TSZ品牌ELISA試劑盒,制備齊全,種屬涉及人、大鼠、小鼠、豬、雞、植物等。保證質(zhì)量,*,提供全程技術(shù)指導(dǎo)服務(wù),歡迎您致電我司錢經(jīng)理咨詢。

            

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