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鱟試劑的試驗方法

更新時間:2022-11-01   點擊次數:752次

鱟的身上流淌著一種十分珍奇的血液。這種血液是淡藍色的。這種淡藍色的血液中含銅量很高,而且一遇到細菌就會凝固。利用鱟血液的這種特殊反應,對它進行處理,可以制成一種特殊的檢驗試劑--"鱟試劑"。鱟試劑可以準確、快速地檢測人體內部組織是否因細菌感染而致病;在制藥和食品工業中,也可用它對毒素污染進行監測。

 

細菌內毒素檢查法包括兩種方法,即凝膠法和光度測定法,后者又包括濁度法和顯色基質法。則鱟試劑可分為:凝膠法鱟試劑、動態濁度法鱟試劑、終點濁度法鱟試劑、動態顯色法鱟試劑和終點顯色法鱟試劑。凝膠法鱟試劑通過與內毒素產生凝集反應的原理來定性檢測或半定量內毒素的方法。動態濁度法鱟試劑、終點濁度法鱟試劑、動態顯色法鱟試劑和終點顯色法鱟試劑則都是定量檢測內毒素的

  

選擇合適的操作方法與順序,在鱟試劑的使用過程中尤為重要。在操作過程中要注意以下幾點:

(1) 實驗室要求潔凈、無塵埃流通;檢驗人員同時注意衛生的保持。在整個使用操作過程中應防止微生物的污染,例如空氣的流動,人員的口沫、汗液污染等。

(2) 鱟試劑開啟、溶解和配制時應盡量避免將安瓿外瓶壁臟物、瓶壁碎片、砂輪鋸屑等異物混入鱟試劑中,避免鱟試劑外損。

(3) 鱟試劑中含有多種蛋白質,用力振搖會產生氣泡,一旦起泡難以消除,而影響檢測的準確性,所以在整個操作過程中都要輕力以避免因過分震動而引起的誤差。

(4) 量取和加樣反應物時,一定要加到試管底部接近鱟試液而不接觸鱟試液的管壁處。

(5) 凝膠的最適pH值為6~8,對于氯化鈉注射液葡萄糖注射液(5%,10%)等注射液,不需考慮供試液的pH值,而檢查其他制劑時,尤其是一些本身緩沖能力較強或偏酸、堿的供試品,應考慮供試品的pH值。

(6) 使用時要嚴格控制溫度和時間。當鱟試劑一加入內毒素及樣品混合液中時反應已開始,并在一定的溫度范圍內,反應溫度越高,反應速率越大;保溫時間的增長,也會提高鱟試劑的靈敏度,增加假陽性的發生,導致較大誤差。因此,要注意控制溫度的變化和保溫時間。

(7) 保持實驗器具的潔凈。每次檢驗完畢,應及時將玻璃器具充分清洗后于250℃干熱滅菌處理,待烤箱溫度升至設定的溫度后開始計時,干烤至少1h。也可用其他經確證不干擾細菌內毒素的檢查的適宜方法。對于塑料、橡膠等不耐熱器材可用30%雙氧水浸泡4h,用無熱原水沖洗,70℃干燥備用。

 

鱟試劑的貯存

雖然凍干的鱟試劑在常溫條件下是相對穩定的,但還是應存放在2℃~8℃下,避免長時間放置在高于25℃的溫度條件下導致因貯藏不當、質量下降而引起的檢驗誤差





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